Cómo Endospore Stain: 12 Pasos (con imágenes)

Una endofora es una forma inactiva de la bacteria que le permite sobrevivir a las condiciones ambientales pobres. La mancha de esporas es una mancha diferencial utilizada para detectar la presencia y la ubicación de las esporas dentro de ciertas bacterias. Se sabe que varias bacterias, especialmente las del género Bacillus y Clostridium, producen endasporas. La tinción endofora se utiliza para diferenciar y categorizar las bacterias. También es muy importante en la medicina y en la industria alimentaria. Ya que son difíciles de destruir, es imperativo determinar si están presentes en alimentos enlatados y, por lo tanto, evitan las enfermedades para proteger a los compradores.

Pasos

1. Prepárese para el experimento poniéndose en guantes, con una capa de laboratorio y recolección de materiales. Ver las cosas que necesitará a continuación para hacer referencia. Agarra una diapositiva y enjuague con agua y jabón. Use papel bibuloso para secar la diapositiva. Use un sharpie negro para dibujar un círculo en la parte inferior de la diapositiva para identificar el área para la cual las bacterias serán manchadas.

Importante trabajo de seguridad de laboratorio consiste en gafas de gafas, zapatos de punta cerrada, guantes y abrigo de laboratorio.

2. Llama el bucle de inoculación y espere 10 segundos antes de colocar el bucle en la pipeta de bacterias.

Hacer un frotis de bacterias en la diapositiva. Llama el bucle nuevamente y coloca el bucle en la rejilla de secado. En llamas, el bucle garantiza que cualquier bacteria que pueda haber residido en el bucle antes de usarla.

3. Configure un quemador de Bunsen en su soporte de anillo con la abrazadera de anillo y una gasa de alambre sobre él.

4. Llene la lata con agua del grifo hasta que sea aproximadamente medio lleno. Coloque la lata en la parte superior de la gasa de alambre en la abrazadera del anillo.

5. Encienda el quemador de Bunsen para calentar / hervir el agua.Deje que comience a aparecer vapor antes de poner la diapositiva en la lata.Coloque la diapositiva con frotis en la parte superior de la lata.

6. Coloque un trozo de toalla de papel en la parte superior del frotis en la diapositiva y empape la toalla de papel con el tinte verde de Malachite.

7. Vapor el frotis sobre el agua durante 5 minutos.

Si la malaquita se evapora, agrega más. Mantener el papel mojado.

Use fórceps para tomar la diapositiva cuando haya terminado, estará caliente.

8. Deje que la diapositiva se enfríe, retire el papel y enjuague con agua durante 30 segundos.

9. Agregue Safranin a la diapositiva durante 1 minuto. El cubilete de plástico se puede utilizar para drenar el exceso de tinte.

10. Enjuague la safranina con agua para eliminar el exceso de tinte. Borra la diapositiva entre hojas de papel bibuloso para secarse. Después de secar la diapositiva, se puede examinar bajo un microscopio.

11. Ver la diapositiva. Colócalo en el escenario. Para este tipo de mancha, las bacterias solo se pueden ver en el objetivo más alto (100x), conocido como la lente de inmersión de aceite. Este aceite mejora la resolución de energía y permitirá que la luz se enfoque perfectamente en el espécimen.

12. Examina la diapositiva para ver la EndPore. La célula vegetativa aparecerá roja / rosa, mientras que la endospora en sí está manchada verde. Las esporas pueden estar ubicadas terminales, medias o subterminales dentro de la célula vegetativa.

Cosas que necesitarás

Bacterias apropiadas que producen endasporas
Verde malaquita
Safranina
Diapositivas de microscopio
BUSTSEN QUERADOR
Soporte de anillo
Asa de inoculación
Tela metalica
lata
Microscopio
Papel bóvulo

Consejos

Lea las instrucciones cuidadosamente.

Asegúrate de no hacer que el frotis sea demasiado grueso porque esto causará complicaciones al ver la EndPore.

Presta atención al tiempo durante el experimento.

Advertencias

Si la cristalería se rompe, dispone de cristalería y bacterias a través de medios apropiados. Además, asegúrese de seguir los procedimientos de protocolo apropiados en todo momento con respecto al desgaste de laboratorio y el equipo de manejo.